凍存過的全血為什么不建議再拿來做ELISA實驗

很多ELISA實驗新手客戶都會咨詢我司技術能否把全血提取出來放-70℃條件保存，等實驗開展了（比如一個月左右的時間）再離心全血取血清或者血漿做ELISA實驗？這種做法我司技術都是持反對建議的。與此同時，也是明確要求我司銷售人員在與客戶售前溝通時建議老師全血樣本提取好了應該及時離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存，如果一個月左右可以開展實驗可以-20℃保存，期間不能反復凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來做elisa的具體原因如下：

原因一、全血凍存后解凍，用常規離心方式提取血清仍然是可以的，*不利的一點是，伴隨凍融的過程，會出現比較嚴重的溶血事件。而zui后提取出來的血清能否做elisa，主要取決于溶血程度、你所要檢測的目標蛋白的性質及你實驗的zui終目的。

原因二、溶血釋放的胞內組分往往容易影響本底，甚至出現假陽性；而蛋白酶的釋放可能導致目的蛋白的降解zui終影響結果；目的蛋白的大小、穩定性、特異性（相對抗體而言）又影響其自身與酶標板的吸附、自身降解、自身與抗體的結合率等等。以上各種不確定性因素存在下，如果你只是對血清中某種血清蛋白做定性檢測的話，做elisa應該問題不大；若是定量分析的話，從可靠性的角度上看，不建議該做法。